聚维酮碘水溶液中聚维酮含量的HPLC测定方法与流程

现有技术公开了聚维酮碘（pvp-i）是1-乙烯基-2-吡咯烷酮聚合物与碘的复合物，已制成软膏、凝胶、栓剂、液体制剂等多种剂型，广泛应用于皮肤和黏膜的和感染。应用实践表明，聚维酮碘溶液作为一种剂，能缓慢释放碘，发挥作用，具有组织刺激性小、性能相对稳定、毒性低等优点。 2014年，农业部正式批准聚维酮碘口服液作为猪、鸡等家畜腹泻的新药上市。它已经被许多公司测试并显示出良好的效果。但目前实践中存在聚维酮碘液制剂中聚维酮含量不同，与碘络合程度不同等缺陷，导致很多溶液不稳定，易光解。因此，内蒙古聚维酮碘溶液中聚维酮含量的测定对于聚维酮碘制剂的质量控制和药品安全尤为重要。此外，聚维酮是世界上重要的药用辅料。没有关于测定方法的报告。

基于现有技术的现状，本申请的发明人打算提供一种测定聚维酮碘溶液中聚维酮含量的方法，特别是一种测定聚维酮碘水溶液中聚维酮含量的HPLC方法。解决方案 。

技术实现要素：

本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种测定聚维酮碘溶液中聚维酮含量的方法，特别是一种分析测定聚维酮碘溶液的方法。吡啶酮碘水溶液中聚维酮的含量。

为此，本发明采用的技术方案是：

使用c18色谱柱，以乙腈-水混合溶剂为流动相，用紫外检测器测定聚维酮碘水溶液中的聚维酮含量；

本发明中乙腈-水混合溶剂的体积比为5:95，聚维酮色谱峰的保留时间为4.60min，峰形良好。

本发明中，流速为0.8ml/min，紫外检测波长为205nm，聚维酮色谱峰不受样品中溶剂峰等成分的干扰；

本发明方法适用于聚维酮碘液体制剂的检测。对于维酮的含量，在本发明的一个实施例中，使用聚维酮碘水溶液作为待测样品。

本发明提供的聚维酮碘水溶液中聚维酮含量的HPLC测定方法中，对照品溶液和样品溶液的制备步骤如下：

1）取聚维酮对照品约0.01g，精密称定，置于10ml容量瓶中，加水溶解，调至刻度，摇匀，得1mg/ml聚维酮对照品溶液；

2）取约2ml的聚维酮碘水溶液，精密量取，置于10ml容量瓶中，用水稀释，调整体积至刻度，摇匀，得到浓度为10mg/ml的溶液，准确量取取该溶液1ml，置于10ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得聚维酮碘样品溶液。

待测样品分析确定后，显示结果。本发明的聚维酮碘水溶液中聚维酮含量的HPLC测定方法简便、快速、准确、灵敏，特别适用于聚维酮碘水溶液中聚维酮含量的测定，以及测定聚维酮碘水溶液中聚维酮含量的方法。本发明有助于提高聚维酮碘液体制剂的质量控制和用药安全性。

图纸说明

图 1 是空白溶剂（水）的高效液相色谱图。

图2是聚维酮参比溶液的高效液相色谱图，

其中： 1 是聚维酮。

图3是聚维酮碘水溶液稀释剂的高效液相色谱图，

其中： 1 是聚维酮。

图4是聚维酮对照品峰面积对浓度的线性图，

其中：横坐标为聚维酮对照品浓度(mg/ml)，纵坐标为聚维酮峰面积。

下面对本发明的具体实施方式进行详细说明。以下实施例仅用于说明本发明的技术思想，不能限制本发明的保护范围。在此基础上所作的任何改动，均在本发明的保护范围之内。

具体实现：

示例 1

一、仪器和试剂

1.1 仪器

shimadzulc-10ad型高效液相色谱仪，包括lc-10ad四元泵、spd-a紫外检测器、sto-10a柱温箱，带有 20μl 定量环的手动进样器（日本岛津公司）； hs2000色谱数据工作站（杭州英普科技发展有限公司）；

1.2 试剂

聚维酮对照品（re-goldchemicalco.ltd，纯度99.8%（干品），批号：03700184807）；聚维酮碘水溶液（实验室自制）；乙腈（hplc纯，j&kchemica，批号：lp50k04）；去离子水（由illiporedirect-q纯水发生器制备）；

2、方法

2.1 溶液的制备

聚维酮对照品溶液的制备：取聚维酮对照品约0.01g，精密称取，置10ml容量瓶中，加水溶解，定容至刻度，摇匀，得1mg/ml聚维酮对照品解决方案;

聚维酮碘样品溶液的制备：取聚维酮碘水溶液约2ml，精密称取，置于10ml容量瓶中，加水稀释，调至刻度，摇匀，得浓度为10mg/ml的溶液;精密量取该溶液1ml，置于10ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，得聚维酮碘样品溶液；

2.2 色谱条件

色谱柱：dikmac18柱（4.6mm×150mm，5μm）

流动相：乙腈-水体积比5:95

流速：0.8ml/min

紫外检测波长：205nm

柱温：20℃

进样量：20μl

2.3 方法学调查

2.3.1 色谱系统适用性实验：取20μl浓度为1mg/ml的聚维酮对照溶液进行分析，根据聚维酮峰理论塔板数不小于2500；

2.3.2 本方法独有 性质：按本方法测定对照品和试样溶液，得到相应的保留时间t=4.60min。聚维酮色谱峰不受样品中溶剂峰等成分的干扰，峰形良好（如图1、2所示）。 , 3);

2.3.3 线性范围：制剂浓度为0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1mg/ml对照品溶液，每次取20μl进样，按上述色谱条件进行分析，以聚维酮峰面积a（n=6）对质量浓度c（mg/ml）作图（标准品）曲线如图4），得到线性回归方程：a=554347c+5484.6（r=0.9998，n=6），结果表明：在0.1～1mg/ml范围内，聚维酮峰面积a与浓度c呈良好的线性关系；

2.3.4 方法灵敏度：将线性范围内小浓度的对照品溶液用水逐渐稀释。经测定，本方法对聚维酮的检出限为0.05μg/ml（s/n=3）；定量限为0.2μg/ml（s/n=10）；

2.3.5 方法准确度（以回收率表示）：分别配制浓度为0.3、0.5、0.7 mg/ml的对照品溶液，依法测定回收率，测定对照品溶液的方法回收率如表 1 所示。

表 1 测定聚维酮含量的 hplc 方法 方法回收率 (%, n=3)

2.3.6 方法精密度：配置浓度为0.2、0.6、1mg/ml的样品溶液，按上述色谱条件进行分析，内测定3次日内精密度；连续三天测量日内精密度，结果见表2；精密测试结果

2.3.7 方法稳定性：配置浓度为1 mg/ml的样品溶液，分别在0、1、3、5、7、9、12、24小时进样20 μl，按以上色谱条件分析研究溶液的稳定性；结果表明，24h内峰面积无明显变化，峰面积rsd=0.02%，说明24h内样品稳定；

2.3.8 加样回收率：精密量取聚维酮碘样品溶液各5ml（约相当于聚维酮0.25mg），分三组（每组3份），置于容量瓶中，加入0.20 mg/ml、0.25mg/ml、0.30mg/ml5ml聚维酮标准溶液（相当于样品溶液中聚维酮含量的80%、、120%，即0.20mg、0.25mg、0.30mg的聚维酮），加入样品后分别取三种溶液 HPLC法用于测定，每次进样20ul，结果见表3；加样回收率计算公式为：

加样回收率=（实测浓度-1/2加样浓度）/（1/2加标浓度）×。

表3 聚维酮加样回收率测定结果（%，n=3）

2.4 样品中聚维酮含量的测定：

取聚维酮碘20 μl样品溶液进样分析，记录色谱图；样品含量测定结果的计算方法为：将测得的样品溶液中聚维酮峰面积带入标准曲线，得到样品溶液中聚维酮的含量，即\n

聚维酮碘水溶液中聚维酮的百分含量=0.1×50×样品溶液中聚维酮的含量

计算结果如表4所示：

表4 HPLC法测定聚维酮碘水溶液中聚维酮含量的结果

本发明的实验结果表明，HPLC法测得的三种聚维酮碘水溶液中聚维酮的含量分别为1.21%、1.16%、1.19%。 %。